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世联翻译公司完成医学“母婴”中文翻译
发布时间：2020-03-04 08:02 点击：
世联翻译公司完成医学“母婴”中文翻译
母乳喂养对产妇及婴儿有多方面的优势，可减少产后出血，减少乳腺癌和卵巢癌的发病，并且在促进婴儿免疫系统发育方面有着无可比拟的优越性[1]，但缺乳却经常困扰着较多产后妇女。在治疗产后缺乳中，中草药治疗产后缺乳功效得到长期临床经验的验证，在民间也被广泛的采纳和接受。通草，为五加科类植物，是目前民间医学及中医中应用最为广泛的中草药之一，它具有良好的通气下乳的功效[2]，但目前国内外学者对其药用机理的研究甚少，关于其催乳的药用机理及实验室研究几乎是空白。本实验通过动物实验及体外细胞实验，运用荧光定量RT-PCR 方法及Western技术了解通草的药理作用，初步探讨通草在哺乳期增加乳汁分泌的途径和作用机理，及其对乳汁成分的影响，为推广通草在临床上治疗产后缺乳提供理论依据。1、材料与方法1.1材料1.1.1、实验动物：远交系清洁级ICR小白鼠，约20g左右，共16只随机分为阴性对照组8只及通草组8只，均被分别放在36x48规格的塑料鼠笼中，在12h光照和12h黑暗的条件下进行喂养，环境温度为20℃~25℃。1.1.2、实验仪器设备Biotek连续光谱多通道酶标仪(BioTek Synergy H1 Hybizl Render)，ABI Prism®7300 实时荧光定量PCR 仪，CO-150 CO2 培养箱，恒温水浴，TGL-16G高速离心机（Thermo），化学发光成像仪（BIO-RAD, ChemiDoc XRS+），PCR 仪(GeneAmp PCR System 9700)，BIO-RAD小型垂直电泳槽（Mini-PROTEAN Tetra System）。1.1.3、实验试剂RPMI1640培养基（Gibco），FBS（Gibco），EGF（Sigma），胰岛素（Sigma），M-MLV 逆转录酶（ABI），Trizol（Invitrogen），RIPA裂解液（Pierce），Western发光成像试剂盒（Pierce），BCA蛋白浓度测定试剂盒（Pierce），乳糖测定试剂盒(Biovision)，荧光定量PCR 试剂盒（Takara）。1.2 方法1.2.1通草浓缩提纯通草提纯浓缩制剂置备过程：选取通草药材经鉴定后，采用水提醇沉法提取有效组分[3]。将1公斤通草生药在20倍蒸馏水浸泡24小时，然后放入100℃沸水浴中加热4小时，过滤后保存提取液，重复上述过程2次，合并3次水煮液。用4层纱布过滤杂质后，在3000rpm下离心15分钟，取其上清液，旋转蒸发浓缩至原体积的1/3，浓缩液加入无水乙醇，使浓缩液中乙醇浓度达到75%，4℃静置过夜，3000rpm下离心15分钟，取上清液然后旋转蒸发浓缩至4g生药/ml，置冰箱-20℃保存备用。1.2.2动物实验设计将16只产后ICR母鼠分成2组，阴性对照组8只及通草处理组组8只。通草处理组每日通过灌胃方式给予母鼠通草提取液约0.25 ml，阴性对照组给予等量生理盐水。在哺乳第1，3，8，13，18天通过检测幼鼠体重来计算母鼠每天泌乳量。具体将母鼠与幼鼠分离4h，然后重新合笼吸吮2h 后，分别称取合笼前与合笼后幼鼠窝重，通过公式yield(g/pup/day)=0.0322+0.0667(weight)+0.877(gain/d)得出母鼠的泌乳量，并进行两组比较[4]。分离和合笼过程中尽量控制实验室的温度和湿度，避免光及声音的刺激，避免惊扰，以减少对母鼠喂养及小鼠吮吸的影响。1.2.3哺乳期血清催乳激素水平检测哺乳期第1，3，8，13天小鼠喂养称重后（即每日下午4点左右），分别采集阴性对照组和通草处理组母鼠尾部血液，通过ELISA方法检测血清中催乳激素的水平。1.2.4乳汁中蛋白质和乳糖含量测定小鼠取奶前，腹腔注射2IU催产素，通过真空负压采集乳汁用于检测。通过BCA蛋白浓度检测试剂盒与乳糖检测试剂盒分别测定阴性对照组和通草处理组母鼠乳汁中蛋白质和乳糖含量。1.2.5小鼠乳腺上皮细胞培养HC11小鼠乳腺上皮细胞基础培养条件为RPMI1640+10% FBS+胰岛素(10ug/ml)+EGF(10ng/ml)。处理细胞前，先将细胞消化后移入6孔板中，使每孔细胞浓度均在1*10^5个/ml左右，将培养液换为诱导培养基（RPMI1640+10ug/ml胰岛素）。将细胞分为对照组、低剂量通草处理组和高剂量通草处理组。在培养液中加入通草提取液，使低剂量组和高剂量组通草终浓度达到100ug生药/ml和500ug生药/ml，对照组培养液中加入等量乙醇。细胞置于CO2 培养箱恒温培养24小时。1.2.6细胞总RNA抽提与荧光定量PCR将对照组、低剂量通草组和高剂量通草组细胞通过Trizol抽提总RNA，采用的逆转录酶转录成cDNA，通过SYBR Green方法进行荧光定量PCR，分别扩增内参GAPDH、酪蛋白基因及乳清蛋白基因。引物如下：乳清蛋白基因上游引物：5’-CAAGAAGATCCTGGCTATCA-3’，下游引物：5’- AGATCATCTTCACAGGAATAGC-3’;β-酪蛋白基因上游引物：5’-TCACTCCAGCATCCAGTCACA-3’，下游引物：5’-GGCCCAAGAGATGGCACCA-3’; GAPDH 基因上游引物：5’-ACTCCCACTCTTCCACCTTC-3’，下游引物：5’-TCTTGCTCAGTGTCCTTGC-3’。1.2.7 Western 印迹分析将对照组、低剂量通草组和高剂量通草组细胞通过RIPA裂解液抽提总蛋白，通过Western方法检测细胞内酪蛋白、STAT5和磷酸化STAT的表达，Western具体方法参见文献[4]。1.3数据分析采用SPSS13.0统计软件进行数据分析并绘制图表。数据分析采用t检验或方差分析，分析结果以P值小于0.05作为有统计学差异的标准，小于0.01作为有显著统计学差异的标准。2、结果2.1通草对小鼠乳汁分泌量的影响结果表明，通草组小鼠在哺乳的第1、3、8、13及18天的泌乳量均高于对照组小鼠的泌乳量，但其中第1天及第18天两组乳汁量的差异无统计学意义 ，而第3、第8及第13天通草组小鼠的泌乳量明显高于对照组（P<0.05），有统计学差异。见图1及表1。注：*代表具有统计意义（P<0.05）图1 对照组和通草处理组小鼠乳汁分泌量Fig1 Milk expression in control group and medulla tetrapanacis treated group通草组泌乳量（g）n=8 对照组泌乳量（g）n=7 P值产后第1天 0.2174±0.0096 0.2147±0.0121 >0.05产后第3天 0.3963±0.0313 0.3600±0.0147 <0.05产后第8天 0.6960±0.0465 0.6294±0.0252 <0.05产后第13天 0.8977±0.0390 0.8316±0.0370 <0.05产后第18天 1.0703±0.0482 1.0405±0.0503 >0.05表1 对照组和通草处理组小鼠乳汁分泌量Fig1 Milk expression in control group and medulla tetrapanacis treated group2.2通草对母鼠血清催乳激素水平的影响结果表明，通草组和对照组两组在哺乳第1，3，8，13天催乳激素水平比较无统计学差异（P>0.05）。见图2。图2 对照组和通草处理组小鼠血清催乳激素Fig2 Serum PRL in control group and medulla tetrapanacis treated group2.3通草对母鼠乳汁中蛋白质及乳糖含量的影响结果表明，通草组母鼠乳汁中蛋白质浓度为119.567ug/ml，明显高于对照组母鼠乳汁中蛋白质的浓度100.562ug/ml（P<0.01），见图3，通草组母鼠乳汁中乳糖浓度53.072mmol/L低于对照组母鼠乳汁中乳糖浓度63.290mmol/L（P<0.05），见图4。注：*代表具有统计意义（P<0.01）图3 对照组和通草处理组小鼠乳汁蛋白质浓度Fig3 Milk protein concentration in control group and medulla tetrapanacis treated group注：*代表具有统计意义（P<0.05）图4 对照组和通草处理组小鼠乳汁乳糖浓度Fig4 Milk lactose concentration in control group and medulla tetrapanacis treated group2.4通草对HC11乳腺上皮细胞中酪蛋白和乳清蛋白表达的影响。通过荧光定量PCR分析不同剂量通草提取液对HC11乳腺上皮细胞中酪蛋白和乳清蛋白mRNA表达的影响，见表2。结果显示，低剂量通草和高剂量通草处理HC11乳腺上皮细胞能够明显增加β-酪蛋白的mRNA的表达（P<0.01），见图5；低剂量通草和高剂量通草能够明显增加HC11乳腺上皮细胞乳清蛋白mRNA的表达量，但是低剂量通草对乳清蛋白mRNA表达量的影响没有显著差异（P>0.05），而高剂量通草对乳清蛋白mRNA表达量的影响具有统计学意义（P<0.01），见图6。通过Western印迹分析不同剂量通草提取液对HC11乳腺上皮细胞中酪蛋白表达的影响。结果显示，高剂量通草提取液能够明显增加酪蛋白的表，见图7。组别 β-酪蛋白表达量 乳清蛋白表达量对照组 0.955±0.094 * 1.460±0.681通草低剂量组 2.631±0.389 * 3.781±1.052通草高剂量组 3.995±0.192 * 7.702±2.597 *未带“*”的两组比较无统计学差异（P>0.05）,其余组间比较均有统计学差异（P<0.01）表2 对照组、低剂量通草组和高剂量通草组用Real-time PCR检测酪蛋白及乳清蛋白mRNA表达水平Fig5 Expression of Casein mRNA and lactalbumin mRNA detected by real-time PCR in control group, low-dose and high-dose medulla tetrapanacis treated group注：*代表具有统计意义（P<0.01）图5 对照组、低剂量通草组和高剂量通草组用Real-time PCR检测酪蛋白mRNA表达水平Fig5 Expression of Casein mRNA detected by real-time PCR in control group, low-dose and high-dose medulla tetrapanacis treated group注：*代表具有统计意义（P<0.01）图6 对照组、低剂量通草组和高剂量通草组用Real-time PCR检测乳清蛋白mRNA表达水平Fig6 Expression of lactalbumin mRNA detected by real-time PCR in control group, low-dose and high-dose medulla tetrapanacis treated group图7 对照组、低剂量通草组和高剂量通草组用Western印记检测酪蛋白表达水平Fig7 Expression of casein detected by Western blot in control group, low-dose and high-dose medulla tetrapanacis treated group2.5通草对HC11乳腺上皮细胞中STAT5信号通路的影响通过Western印迹分析不同剂量通草提取液对HC11小鼠乳腺上皮细胞中STAT5和磷酸化STAT5的表达。对照组、低剂量组和高剂量组中总STAT5蛋白表达无明显差异，但是通草处理能够明显增加STAT5的磷酸化水平，并且具有量效关系，见图8。图8 对照组、低剂量通草组和高剂量通草组用Western印记检测STAT5和p-STAT5表达水平Fig8 Expressions of STAT5 and p-STAT5 detected by Western blot in control group, low-dose and high-dose medulla tetrapanacis treated group3、讨论乳汁分泌由一系列复杂的生理过程组成，受到多种激素的调控，而对于乳汁生成最重要的激素是脑垂体前叶分泌的催乳激素[5]。催乳激素在整个泌乳过程中起到核心作用，它通过乳腺上皮细胞Jak／Stat通路促进乳汁分泌和诱导合成乳汁中重要的营养物质[6]。目前，大多数促进乳汁分泌的西药都通过中枢增加催乳激素水平,从而促进乳汁分泌。如多潘立酮，能够干扰多巴胺抑制垂体前叶制造催乳激素的作用，间接使得催乳激素合成增加，增加泌乳[7]，但它同时可引起产妇出现胃肠道和心血管方面的副反应[8]。中国传统中药通草在治疗产后缺乳方面有其独到之处，它的功效得到长期临床经验的验证，且作用温和，副反应小，在民间也被广泛采纳和接受。我们通过实验研究通草的药理作用，初步探讨通草发挥催乳作用的途径和机理。实验结果表明，通草组母鼠产后的泌乳量明显高于阴性对照组母鼠，特别在第3天和第8天和第13天乳汁分泌量较阴性对照组母鼠有统计学差异。通过测定母鼠体内催乳激素水平发现，通草组母鼠外周血中催乳激素水平虽有所升高，但其升高的水平较对照组相比并无统计学差异，可见通草可能并没有作用于丘脑－垂体－性腺轴来增加催乳激素的分泌而达到促进乳腺细胞泌乳。通草处理HC11乳腺上皮细胞后，细胞内总STAT5蛋白表达无明显差异，但是STAT5的磷酸化水平明显增加，并且具有量效关系。由此我们推测，通草可能直接作用于乳腺靶细胞，增加细胞信号传导通路中转录激活因子STAT5的磷酸化水平，使细胞内信号传导加强，从而促进乳汁的分泌；也可能通草作用后能够增加细胞表面催乳激素受体数量或活性，导致细胞内STAT5的磷酸化水平增加。而通草对于乳汁成份的影响主要是增加乳汁中蛋白质的含量，特别是蛋白质中乳清蛋白和酪蛋白的的含量，而对于乳汁中的乳糖却使其含量减少，其原因和机制有待进一步研究探讨。 本实验仅为对通草增加乳汁分泌的机理的一个初步探讨，仍有些方面需深入实验，以期对通草通乳的机理有全面的阐述。总之，通草可以通过作用于细胞信号传导通路中的转录激活因子STAT5，增加STAT5磷酸化水平，加强细胞内信号传导，增加乳腺细胞泌乳量和乳汁中蛋白含量，能有效治疗产后缺乳。Unitrans世联翻译公司在您身边,离您近的翻译公司,心贴心的专业服务,专业的全球语言翻译与信息解决方案供应商,专业翻译机构品牌。无论在本地,国内还是海外,我们的专业、星级体贴服务，为您的事业加速！世联翻译公司在北京、上海、深圳等国际交往城市设有翻译基地，业务覆盖全国城市。每天有近百万字节的信息和贸易通过世联走向全球！积累了大量政商用户数据，翻译人才库数据，多语种语料库大数据。世联品牌和服务品质已得到政务防务和国际组织、跨国公司和大中型企业等近万用户的认可。 专业翻译公司,北京翻译公司,上海翻译公司,英文翻译,日文翻译,韩语翻译,翻译公司排行榜,翻译公司收费价格表,翻译公司收费标准,翻译公司北京,翻译公司上海。- 上一篇：第二批！新冠肺炎疫情相关词汇，英语怎么说？
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